1. Aggiunta di campioni: aggiungere la diluizione del campione alla piastra rivestita, diluire il siero in PBS o soluzione salina a 1:20, quindi aggiungere 10 ul ai pozzetti di reazione della micropiastra.

2. Aggiunta del controllo: controllo negativo a 3 pozzetti, controllo positivo a 1 pozzetto e siero di controllo da 100 ul.

3. Incubazione: agitare la piastra di reazione per miscelare bene il campione, quindi collocarlo in un incubatore a 37 °C o in un bagno d'acqua per 20 minuti.

4. Lavaggio pavimenti: Diluire 15 ml di soluzione detergente a 300 ml con acqua distillata. Durante il lavaggio a mano, il contenuto dell'aria della piastra di reazione deve essere versato e posizionato nel foro riempito con il liquido di lavaggio, quindi riposare per 30° per agitare violentemente. Ripetere questa operazione 5 volte e battere a secco. La macchina deve eseguire 5 volte. 200 ul di soluzione di lavaggio possono essere iniettati in ciascun pozzetto o riempiti, quindi lasciati per 30 minuti e asciugati.

5. Aggiungere una soluzione di lavoro marcata con enzima: aggiungere 100 ul di soluzione di lavoro marcata con enzima a ciascun pozzetto in un incubatore a 37 °C e lavare la piastra cinque volte dopo 20 minuti. La piastra di lavaggio è la stessa del punto 4.

6. Questa è l'ultima fase della reazione, con sviluppo del colore e terminazione della reazione: 50 ul di substrato vengono aggiunti al pozzetto di reazione e il colore viene sviluppato per 10 minuti al buio a 37°C. La soluzione in ciascun pozzetto è stata fermata e mescolato per terminare la reazione. L'uso delle micropiastre deve essere eseguito in condizioni sterili. Disinfettare e pulire accuratamente le piastre dopo l'uso, ma si noti che alcune piastre devono leggere attentamente le istruzioni per vedere se possono essere sterilizzate ad alte temperature.